檢測血液中酒精含量氣相色譜儀在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用
酒精的作用在醫(yī)學(xué)和法醫(yī)學(xué)上都很有意義。當(dāng)醫(yī)生需要知道酒精是否與病人的病情有關(guān)時,對血液或尿液中酒精的含量的估計就會起到相當(dāng)關(guān)健的作用。從法醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)來看,酒精含量在突然死亡、駕駛事故以及有關(guān)以喝醉酒作為防衛(wèi)性辯解等案件中是至關(guān)重要的。決定攝入酒后顯示出乙醇濃度及量的時間的因素是:對象的體重、乙醇的量及濃度、攝入乙醇的方式、有無食物存在以及對象的身體狀況。
酒精的影響對不同的人以及在不同時間的同一個體都是各不相同的。其作用主要取決于各人的所處的環(huán)境和體質(zhì)以及所飲酒精的稀釋情況。飲用同等量的酒精對習(xí)慣性飲酒者所造成的影響較偶爾飲酒者小得多。藥物有加強(qiáng)酒精效果的作用。
很多案例表明,酒精與巴比土酸鹽類的協(xié)同作用是一些看似是自我死亡的死亡的一個原因,酒精本身可能是常見的中毒致死的原因。
裝配有火焰離子化檢測器及Porapak Q柱的氣-固色譜技術(shù)在藥物制備中一直被用來鑒定和檢測乙醇、異丙醇以及丙酮。此項(xiàng)技術(shù)是用稀釋過的樣品的水溶液直接進(jìn)樣, 方法簡單而直接。
樣品制備 將兩份0.5毫升的異丁醇內(nèi)標(biāo)物 (濃度為10mg/ml水,其配制法為:用吸量管吸取12.4ml 異丁醇用水稀釋至1L ), 用吸量管分別吸入兩個不同的2-打蘭(7.4毫升)的殼型小瓶中, 一個標(biāo)為“已知”, 另一個標(biāo)為“未知”。取0.5ml乙醇作標(biāo)準(zhǔn)物 (濃度為50mg/100ml血液,其配制法為:吸5ml乙醇貯存液,再從血庫中取100ml血液加以稀釋;所用的乙醇貯存液的配制法為:用水將12.7 ml的無水乙醇稀釋至1升),并將其轉(zhuǎn)移至一個標(biāo)為“已知”的小瓶中。吸量管用內(nèi)標(biāo)溶液洗滌三次。用一支10微升的亨氏注射器, 取0.5微升的已知樣和未知樣各兩份進(jìn)樣, 分別測量乙醇和異丁醇的峰高。
氣相色譜參數(shù) 使用一臺配有氫火焰檢測器的氣相色譜儀?;鹧骐x子化檢測器可用于檢測含水的樣品。柱子為不銹鋼材料(6英尺×0.25英寸外徑), 用30%聚乙二醇2萬固定相涂布在用酸洗過的60-80目的Chromosorb W 擔(dān)體上。柱子用氮?dú)庾鬏d氣于180°C下吹掃隔夜。操作條件為:
爐溫 100或130°C
進(jìn)樣口溫度 160°C
氮?dú)饬魉?nbsp;35ml/min
氫氣流速 28ml/min
氧氣流速 100ml/min
計算 用酒精和內(nèi)標(biāo)物的峰高進(jìn)行計算,可采用下式進(jìn)行計算:
式中: W1 = 乙醇的毫克數(shù)
W2 = 100毫升的未知物
Cs = 標(biāo)準(zhǔn)乙醇溶液的濃度(50mg/ml)
h x = 已知物中乙醇的峰高
hs = 未知物中內(nèi)標(biāo)物(異丁醇)的峰高
Rx = 已知物中乙醇的峰高
Rs = 已知樣中內(nèi)標(biāo)物(異丁醇)的峰高
討論
圖 1 顯示了一份通過注射0.5微升血液-異丁醇內(nèi)標(biāo)混合物而獲得的典型的色譜圖。圖中各峰都被清楚地分開而且峰很尖銳。表1給出了一些常見的揮發(fā)性化合物的保留時間和相對保留時間,這些揮發(fā)性化合物都與酒精的攝取、糖尿病及嗜好嗅粘接劑中的有機(jī)溶劑味等病有關(guān)。。
操作參數(shù)如柱溫或載氣流速并不是確定不變的,它們可隨所研究的化合物的類型及所用氣相色譜儀的性質(zhì)不同而改變。
其它填料也可用于該測定,包括Hallcomid M 180L 涂布在Chromosorb W 80-100 目的擔(dān)體上或Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的優(yōu)點(diǎn)是它是一種無需涂層的填料。
注入系統(tǒng)的血液進(jìn)入進(jìn)樣口并在那里被捕集,而揮發(fā)物被載氣帶入柱中。在柱中進(jìn)樣將會堵塞柱子。所以,如果使用一個長的進(jìn)樣口,將有利于多次進(jìn)樣并能延長使用周期。使用六至八個月后,應(yīng)將進(jìn)樣口拆開并除去被捕集在此的血液,若有必要,可用水清洗。儀器應(yīng)在被再次使用前穩(wěn)定一夜。
根據(jù)峰高進(jìn)行定量測定是令人滿意的,但是,若所獲得的峰太寬或不對稱,也可根據(jù)峰面積進(jìn)行定量。
表 1 一些化合物的保留值
化合物 | 爐溫100度 | 爐溫130度 | ||
保留時間(min) | 相對保留時間(相對于EtOH) | 保留時間(min) | 相對保留時間 (相對于EtOH) | |
乙醛 | 2.56 | 0.73 | 1.25 | 0.60 |
丙酮 | 2.38 | 0.68 | 1.62 | 0.76 |
| 5.62 | 1.61 | 3.25 | 1.53 |
乙醇 | 3.50 | 1.00 | 2.12 | 1.00 |
異丁醇 | 7.25 | 2.10 | 3.94 | 1.86 |
異丙醇l | 3.19 | 0.91 | 2.06 | 0.97 |
乙酸丙酯 | 4.50 | 1.29 | 2.75 | 1.30 |
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