血液中酒精含量檢測氣相色譜法

 酒精的作用在醫學和法醫學上都很有意義。當醫生需要知道酒精是否與病人的病情有關時，對血液或尿液中酒精的含量的估計就會起到相當關健的作用。從法醫學的觀點來看，酒精含量在突然死亡、駕駛事故以及有關以喝醉酒作為防衛性辯解等案件中是至關重要的。決定攝入酒后顯示出大乙醇濃度及量的時間的因素是：對象的體重、乙醇的量及濃度、攝入乙醇的方式、有無食物存在以及對象的身體狀況。

   酒精的影響對不同的人以及在不同時間的同一個體都是各不相同的。其作用主要取決于各人的所處的環境和體質以及所飲酒精的稀釋情況。飲用同等量的酒精對習慣性飲酒者所造成的影響較偶爾飲酒者小得多。藥物有加強酒精效果的作用。

   很多案例表明，酒精與巴比土酸鹽類的協同作用是一些看似是自殺的死亡的一個原因，酒精本身可能是常見的中毒致死的原因。

   裝配有火焰離子化檢測器及Porapak Q柱的氣-固色譜技術在藥物制備中一直被用來鑒定和檢測乙醇、異丙醇以及丙酮。此項技術是用稀釋過的樣品的水溶液直接進樣, 方法簡單而直接。

樣品制備 將兩份0.5毫升的異丁醇內標物 (濃度為10mg/ml水，其配制法為：用吸量管吸取12.4ml 異丁醇用水稀釋至1L ), 用吸量管分別吸入兩個不同的2-打蘭(7.4毫升)的殼型小瓶中, 一個標為“已知”, 另一個標為“未知”。取0.5ml乙醇作標準物 (濃度為50mg/100ml血液，其配制法為：吸5ml乙醇貯存液，再從血庫中取100ml血液加以稀釋；所用的乙醇貯存液的配制法為：用水將12.7 ml的無水乙醇稀釋至1升)，并將其轉移至一個標為“已知”的小瓶中。吸量管用內標溶液洗滌三次。用一支10微升的亨氏注射器, 取0.5微升的已知樣和未知樣各兩份進樣, 分別測量乙醇和異丁醇的峰高。

氣相色譜參數 使用一臺配有氫火焰檢測器的氣相色譜儀。火焰離子化檢測器可用于檢測含水的樣品。柱子為不銹鋼材料(6英尺×0.25英寸外徑), 用30%聚乙二醇2萬固定相涂布在用酸洗過的60-80目的Chromosorb W 擔體上。柱子用氮氣作載氣于180°C下吹掃過葉。操作條件為：

爐溫 100或130°C

進樣口溫度 160°C

氮氣流速 35ml/min

氫氣流速 28ml/min

氧氣流速 100ml/min

計算 用酒精和內標物的峰高進行計算，可采用下式進行計算：

式中： W₁ = 乙醇的毫克數

              W₂ = 100毫升的未知物

         C_s = 標準乙醇溶液的濃度（50mg/ml）

              h _x = 已知物中乙醇的峰高

              h_s = 未知物中內標物（異丁醇）的峰高

              R_x = 已知物中乙醇的峰高

              R_s = 已知樣中內標物（異丁醇）的峰高

討論

   圖 1 顯示了一份通過注射0.5微升血液-異丁醇內標混合物而獲得的典型的色譜圖。圖中各峰都被清楚地分開而且峰很尖銳。表1給出了一些常見的揮發性化合物的保留時間和相對保留時間，這些揮發性化合物都與酒精的攝取、糖尿病及嗜好嗅粘接劑中的有機溶劑味等病有關。。

   操作參數如柱溫或載氣流速并不是確定不變的，它們可隨所研究的化合物的類型及所用氣相色譜儀的性質不同而改變。

   其它填料也可用于該測定，包括Hallcomid M 180L 涂布在Chromosorb W 80-100 目的擔體上或Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的優點是它是一種無需涂層的填料。

   注入系統的血液進入進樣口并在那里被捕集，而揮發物被載氣帶入柱中。在柱中進樣將會堵塞柱子。所以，如果使用一個長的進樣口，將有利于多次進樣并能延長使用周期。使用六至八個月后，應將進樣口拆開并除去被捕集在此的血液，若有必要，可用水清洗。儀器應在被再次使用前穩定一夜。

   根據峰高進行定量測定是令人滿意的，但是，若所獲得的峰太寬或不對稱，也可根據峰面積進行定量。

表 1 一些化合物的保留值

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